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山東高效液相色譜系統的固定相和分離條件的選擇
發布時間:2018-08-24   點擊次數:261次
山東高效液相色譜系統與試樣預處理技術相配合,HPLC 所達到的高分辨率和高靈敏度,使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能,能夠分離復雜相體中的微量成分。隨著固定相的發展,有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離。
 
山東高效液相色譜系統固定相:
1、載體:
(1)表面多孔型載體:由直徑為30~40um的實心玻璃球和厚度為1~2um的多孔性外層組成。
(2)全多孔型載體:由硅膠和硅藻土等材料制成的直徑為30~50um的多孔型顆粒。
(3)全多孔型微粒載體:由納米級的硅膠微粒堆積而成,又稱堆積硅珠。載體粒度為5~10um,由于顆粒小,所以柱效高,是目前使用廣泛的一種載體。
2、固定液:
采用化學鍵合固定相。
3、柱填充技術:
(1)干法填充:適合直徑大于20um的填料。
(2)濕法填充:高壓勻漿填充。
 
山東高效液相色譜系統分離條件的選擇
一、減小柱內展寬:
1、固定相:選用粒徑小、分布均勻的球形固定相。化學鍵合相,勻漿法裝柱。
2、流動相:選用低粘度的流動相,有利于增大組分在溶劑中的擴散系數,減少傳質阻力。
3、流速:約1mL/min。
4、柱溫:25℃左右。
二、減少柱外展寬:
1、柱前展寬:主要由進樣引起,減小進樣器的死體積。
2、柱后展寬:主要由接管、檢測器流通池體積和檢測器響應時間等引起。

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